一、人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA定量試劑盒ZK-00786詳細(xì)介紹

中文名稱(chēng):人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA定量試劑盒ZK-00786

規(guī)格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:人ELISA試劑盒

檢測(cè)波長(zhǎng):450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研，不得用于臨床診斷。

保存及有效期:2-8℃，六個(gè)月

檢測(cè)樣本種類(lèi):用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達(dá)。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

臻科生物供應(yīng)的種屬有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、昆蟲(chóng)、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等

二、實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)水平。用純化的人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)，再與HRP 標(biāo)記的促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)濃度。

三、試劑盒組成

四、操作步驟

五、試劑盒計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的

OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，

即為樣品的實(shí)際濃度。

六、注意事項(xiàng)

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未

用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間

控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定，計(jì)

算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

七．特別提醒

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能

馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。